Peter Quill, der noch immer unter dem Verlust von Gamora leidet, muss sein Team um sich scharen, um das Universum zu verteidigen und einen der seinen schützen zu können. Die Truppe um Star-Lord, Drax und Groot begibt sich auf eine kosmische Odyssee, die eng mit Rockets Vergangenheit verknüpft ist. Ein Scheitern der Mission könnte das Ende der Guardians bedeuten, das nicht zuletzt im Interesse des künstlich erschaffenen Bösewichts Adam Warlock liegt.